氯离子荧光探针MEQ

产品货号：

KFS173

中文名称：

氯离子荧光探针MEQ

英文名称：

MEQ(MQAE)

产品规格：

50mg

发货周期：

1～3天

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MEQ(MQAE)是一个6-甲氧基花青苷衍生物，是细胞内的Cl^-荧光指示剂，该染料可以通过受被动扩散所控制的碰撞淬灭来检测离子浓度。目前，检测Cl^-所用荧光染料主要是MQAE和SPQ，MQAE相比SPQ来说对于Cl^-的浓度有更高的灵敏度和更高的荧光量子比率。

表1.MQAE光谱数据

	Ex	Em	ε	KSV
MEQ	350nm	460nm	2800cm^-1M^-1	200M^-1

随着浓度增加，MQAE的发射光谱

产品组成

组分	规格
氯离子荧光探针MEQ	50mg
说明书	1份

保存：-20℃，避光，有效期6个月。

细胞内Cl^-的测量
MQAE的工作液可以配制于Krebs-HEPES缓冲液中。Krebs-HEPES缓冲液即为20mM HEPES，128mM NaCl，2.5mM KCl，2.7mM CaCl₂，1mM MgCl₂，16mM glucose，pH7.4。MQAE标记细胞时的浓度通常为5～10mM。以约800～1000万细胞每毫升的细胞密度，在含有5～10mM MQAE的Krebs-HEPES缓冲液中孵育30～60分钟。通常一个探针的装载体系为100微升即可。随后用Krebs-HEPES缓冲液或其它适当溶液洗涤5次左右，即可进行相应荧光测定。详细的使用方法请参考相关文献。
以下对胞内氯离子的荧光测量[Cl^-]做简要说明计算。Stem-Volmer方程可以给出氯离子探针的荧光强度与氯离子浓度的关系：

(F_O/F)–1 = KSV[Q]

F_O是没有卤化物或其他淬灭离子时的荧光强度，F是有淬灭剂时的荧光强度，[Q]是淬灭剂浓度，而KSV是Stem-Volmer方程常数。
建议对实验体系进行校准，以得到研究用细胞类型的指示剂探针的Ksv，利用线性回归模型分析Stem-Volmer方程。Stem-Volmer方程中的氯离子Ksv常数可以随着碰撞淬灭的阴离子物质的增多而明显降低，如多肽。便于校准，可以固定胞内氯离子的浓度，通过使用双三丁基氧化锡和尼日利亚菌素10～30μM。为了保证渗透压最好使用阴离子不淬灭染料，取代氯离子，如葡萄糖酸。
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